MagBead Swab DNA Kit 磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒 |
产品内容
MDBJ80-001
MDBJ80-002
Component
100preps
400preps
Buffer KL
60ml
240ml
去蛋白液
60ml
240ml
漂洗液
120ml
480ml
Magbeads
2ml
8ml
产品简介
该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于口腔拭子DNA提取的方法。全血在蛋白酶K与裂解液共同作用下彻底裂解释放基因组DNA，加入乙醇后DNA被磁珠特异性吸附。经漂洗后，洗脱得到的纯净的基因组DNA，可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。
自备仪器、试剂
1）漩涡仪
2）磁力架——货号：SPJ-0212
3）无水乙醇， 75%乙醇
4）向蛋白酶K中加入指定体积无菌水，配成10mg/ml浓度，短时间内使用4℃保存，-20℃长期保存。
5）Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。
操作步骤
1．将在面颊内擦拭过的棉签用剪刀将棉签部分从其杆上剪下放入1.5ml离心管，加入400ul Buffer KL，涡旋震荡混匀，再加入20ul蛋白酶K (10mg/ml)溶液，颠倒混匀，60℃水浴10-15分钟，期间颠倒两次。
2. 用移液器吸取上清，同时挤压棉签，尽量多的取出裂解液，向上述体系中加入400ul 75%乙醇涡旋震荡15秒钟，向离心管中加入50ul充分混匀的Magbeads，涡旋震荡15秒钟后静置1分钟。
3．将离心管放于磁力架上静置1分钟，期间连同磁力架期间颠倒几次，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后倒掉上清（颠倒几次目的是管壁和盖子上的磁珠全部回收）。
4．取出磁力架的磁条，向离心管中加入800ul 75%乙醇震荡混匀10秒钟。插入磁条静置1分钟，期间连同磁力架期间颠倒几次，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后倒掉上清。
5．重复步骤4一次。
6．保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置3-5分钟，使乙醇挥发干净（65℃烘箱可以加速乙醇挥发）。
注意：如果离心管侧壁上有液珠，可短暂离心将残液收集到离心管底部，（再将离心管固定于磁力架上彻底弃去残液。
7. 取出磁条，每管加入30-100 ul 去离子水。吹打混匀室静置1分钟，（放于60℃水浴锅中孵育1分钟，可提高洗脱效率）。
8.插入磁条静置1-2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后，用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
