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MagBead Blood DNA Kit 磁珠法全血DNA提取试剂盒

MagBead Blood DNA Kit 磁珠法全血DNA提取试剂盒
  • 描述:
  • 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于全血DNA提取的方法,提取效率比传统方法更高。全血在蛋白酶K与裂解液共同作用下彻底裂解释放基因组DNA,加入乙醇后DNA被磁珠特异性吸附。经漂洗后,洗脱得到的纯净的血液基因组DNA,可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。该试剂盒可与自动化工作站或磁棒法自动磁珠提取系统配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。

产品介绍

产品内容


MD005-100

MD005-400

Component

100 preps

400 preps

Buffer BL

20ml

80mL

去蛋白液

80ml

320ml

蛋白酶K

20mg

80mg

Magbeads

5ml

20ml

产品简介

该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于全血DNA提取的方法,提取效率传统方法高。全血在蛋白酶K与裂解液共同作用下彻底裂解释放基因组DNA,加入乙醇后DNA被磁珠特异性吸附。经漂洗后,洗脱得到的纯净的血液基因组DNA,可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。

该试剂盒可与自动化工作站或磁棒法自动磁珠提取系统配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。

自备仪器、试剂

1.手动单管提取:

1漩涡仪

2)磁力架

3异丙醇

2.手动96孔深孔板提取:

1)恒温混匀摇床

296孔板磁力架

38通道移液器

4异丙

实验前准备及重要注意事项

1准备好75%的乙醇.

2向蛋白酶K中加入指定体积的无菌水,短时间内使用4保存,-20长期保存。

3Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。

操作步骤

一、手动单管操作

1.取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管, 加入200μl裂解液BL,涡旋震荡混匀,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,颠倒混匀,55水浴10分钟。

2.加入200μl 异丙醇,涡旋震荡混匀15秒钟,向离心管中加入50μl充分混匀的Magbeads,涡旋震荡10秒钟后静置1分钟。

3将离心管放于磁力架上静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(颠倒几次目的是管壁和盖子上的磁珠全部回收)。

4取出磁力架的磁条向离心管中加入800μl 去蛋白液震荡混匀10秒钟插入磁条静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液彻底弃去溶液。

5取出磁力架的磁条向离心管中加入800μl 75%乙醇震荡混匀10秒钟插入磁条静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液彻底弃去溶液。

6.重复步骤4

7.保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置3-5分钟,使乙醇挥发干净。

注意:如果离心管侧壁上有液珠,可短暂离心将残液收集到离心管底部,再将

心管固定于磁力架上彻底弃去残液

8. 取出磁条每管加入30-100 μl 去离子水吹打混匀室静置1分钟,放于50℃水浴锅中孵育1分钟,可提高洗脱效率)

9. 插入磁条静置1-2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用

二、手动96孔板操作

1.取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,2 ml 96孔深孔板(简称深孔板 加入200μl裂解液BL放到震荡摇床震荡混匀1分钟,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,震荡混匀1分钟55水浴10分钟。

2.加入200μl 异丙醇,震荡摇床震荡混匀1分钟每孔中加入充分混匀的50μl充分混匀的Magbeads,震荡混匀1分钟静置1分钟。

3.将深孔板从恒温混匀仪上取下后放于96孔板磁力架上静置1-2分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液。

4.用手动连续分液器或8通道移液器向深孔板中加入800 μl 75%乙醇,之后放于混匀摇床上震荡混匀30钟。

5.将深孔板从混匀摇床上取下后放于96孔板磁力架上静置1分钟。用废液抽吸系统或8通道移液器弃去溶液,期间避免枪头接触磁珠。

6重复步骤5两次

7保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置3-5分钟。

8保持深孔板固定于96孔板磁力架上,将深孔板倒置于干净的吸水纸上放置1分钟。后将深孔板从96孔板磁力架上取下放于60烘箱中放3-5分钟,彻底除去乙醇

9用电动连续分液器或8通道移液器向深孔板加入50-100 μl Buffer 去离子水后置于混匀摇床混匀30秒,静置1分钟

10.将深孔板从混匀摇床上取下后放于96孔板磁力架上静置1-2分钟,用8通道移液器溶液转移至96PCR板中盖盖后-20℃保存备用


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