MagBead DNA/RNA Kit 磁珠法DNA/RNA共提取试剂盒 |
产品内容
MD010-50
MD010-200
Component
50 preps
200 preps
Buffer DL
40ml
160ml
蛋白沉淀液体
40ml
160ml
Magbeads
5ml
10 ml
产品简介
该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于组织细胞DNA/RNA共提取的方法，提取效率比传统方法更高。组织或者细胞裂解液作用下彻底裂解释放核酸，加入乙醇后核酸被磁珠特异性吸附。经漂洗后，洗脱得到的纯净的DNA&RNA，可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。
该试剂盒可与液体工作站或磁棒法自动磁珠提取系统配套使用，简单、快速地进行大规模提取，大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
自备仪器、试剂
1）漩涡仪
2）磁力架
3）二甲苯，无水乙醇
实验前准备
1．准备好75%的乙醇.
2．Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。
操作步骤
1．组织样本预处理：取5-10mg组织，放入研钵中加入液氮研磨，充分磨碎，转移至新鲜的离心管；细胞样本预处理：取1-2×105个细胞，8,000rpm离心1分钟，弃上清收集细胞，向上述组织或细胞细胞体系中加入400μl裂解液DL吹打混匀，55℃水浴5分钟，期间颠倒混匀几次。
2． 加入400μl蛋白沉淀液，颠倒混匀12,000rpm离心5分钟，小心取600μl上清。
3．加入600μl 70%乙醇，涡旋震荡30秒，向离心管中加入50μl充分混匀的Magbeads，涡旋震荡15秒钟后静置1分钟。
4．将离心管放于磁力架上静置1分钟，期间连同磁力架期间颠倒几次，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液（颠倒几次目的是管壁和盖子上的磁珠全部回收）。
5．取出磁力架的磁条，向离心管中加入800μl 75%乙醇震荡混匀10秒钟。插入磁条静置1分钟，期间连同磁力架期间颠倒几次，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液彻底弃去溶液。
6．重复步骤5一次。
7．保持离心管固定于磁力架上，用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液，之后室温放置3-5分钟，使乙醇挥发干净。
注意：如果离心管侧壁上有液珠，可短暂离心将残液收集到离心管底部，再将离心管固定于磁力架上用移液器彻底弃去残液。
8. 取出磁条，每管加入30-100 μl 去离子水。吹打混匀室静置1分钟，（放于50℃水浴锅中孵育1分钟，可提高洗脱效率）。
9.插入磁条静置1-2分钟，待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后，用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。
