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MagBead Tissue/cell DNA Kit 磁珠法组织/细胞DNA提取试剂盒

MagBead Tissue/cell DNA Kit 磁珠法组织/细胞DNA提取试剂盒
  • 描述:
  • 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于组织/细胞DNA提取的方法,提取效率比传统方法更高。组织样本需先用液氮研磨成粉末,组织粉末或者细胞沉淀在裂解液作用下彻底裂解释放基因组DNA,加入乙醇后DNA被磁珠特异性吸附。经漂洗后,洗脱得到的纯净的组织/细胞基因组DNA,可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。

产品介绍

产品内容

 


MD008-100

MD008-400

Component

100 preps

400 preps

Buffer TL

40 ml

160ml

Buffer PE

50 ml

200ml

Buffer PC

40 ml

160ml

Magbeads

5 ml

  20 ml

Proteinase K

20mg

  80mg

RNaseA

1ml

4ml

 

产品简介

该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于组织/细胞DNA提取的方法,提取效率比传统方法更高。组织样本需先用液氮研磨成粉末,组织粉末或者细胞沉淀在裂解液作用下彻底裂解释放基因组DNA,加入乙醇后DNA被磁珠特异性吸附。经漂洗后,洗脱得到的纯净的组织/细胞基因组DNA,可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。

自备仪器、试剂

1)漩涡仪

2)磁力架

3)无水乙醇

 

实验前准备

1. 准备好75%的乙醇.

2. Magbeads使用前需涡旋震荡20秒使其充分混匀。

3. Proteinase K中加入1ml无菌水,配成20mg/ml溶液,短期4保存,

长期-20保存。

 

操作步骤

 

1. 组织样本预处理5-10mg组织,放入研钵中加入液氮研磨,充分磨碎,转移至新鲜的离心管;细胞样本预处理:取1-5×105个细胞,8,000rpm离心1分钟,弃上清收集细胞,向上述组织或细胞体系中加入400μl  Buffer TL10ul Proteinase  K20mg/ml60水浴5-10分钟,期间颠倒混匀几次,至样本全部裂解

2. 将上述裂解好的样本从水浴锅中取出,加入10ul RnaseA10mg/ml)溶液,颠倒混匀,室温放置5分钟

3. 加入400ul Buffer PC ,颠倒混匀12,000rpm 离心5分钟,小心取600ul上清。

*细胞提取实验可跳过此步骤)

4. 加入400μl 75%乙醇,涡旋震荡30,向离心管中加入50μl充分混匀的Magbeads,涡旋震荡15秒钟后静置1分钟。

5. 将离心管放于磁力架上静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后倒掉上清(颠倒目的是管壁和盖子上的磁珠全部回收)。

6. 取出磁力架的磁条,向离心管中加入500μl buffer PE震荡混匀10秒钟。插入磁条静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后倒掉上清

7. 取出磁力架的磁条,向离心管中加入800μl 75%乙醇震荡混匀10秒钟。插入磁条静置1分钟,期间连同磁力架期间颠倒几次,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后倒掉上清。

8. 重复步骤7一次。

9. 保持离心管固定于磁力架上,用移液器去除离心管管底和管盖上的溶液,之后60℃烘箱放置3-5分钟,当磁珠表面没有光泽时说明乙醇挥发干净(或者用小型吹风机迅速吹干)

(注意:如果没有烘箱可短暂离心将残液收集到离心管底部,再将离心管固定于磁力架上彻底弃去残液)

10.  取出磁条,每管加入50-100 μl 去离子水。吹打混匀室静置1分钟,(放于           50水浴锅中孵育1分钟,可提高洗脱效率)。

11.  插入磁条静置1-2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后,用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20保存备用。


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  • 陕西金杰森茂生物科技有限公司

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