产品展示
Pico Green 荧光染料,双链核酸染料 dsDNA染料
产品名称:Pico Green 双链核酸染料
产品价格:1999元/1ml
溶剂:DMSO
吸收波长(nm):480
发射波长(nm):520
存储条件:密封、干燥处、4°C以下保存
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
产品简介:
Pico Green染料是一种新型的dsDNA染料,高度敏感的荧光染料,可检测到pg级DNA。检测范围宽,可跨越4个数量级。特异性好,基本不受ssDNA和RNA的影响,专为双链DNA(dsDNA)设计,其独特的特性在于仅当与DNA双链结合时才会发出荧光信号。此荧光强度与DNA的浓度直接成正比,使得Pico Green能够在存在单链DNA(ssDNA)、RNA及单体核苷酸等复杂环境中,精准检测到低至25 pg/mL的dsDNA浓度。相较于传统的DNA定量手段,Pico Greenn展现出以下几大显著优势:
1.高度特异性:Pico Green对dsDNA具有极强的选择性,不受ssDNA、RNA、蛋白质等常见污染物的干扰,确保了检测结果的准确性和可靠性。
2.超凡灵敏度:其敏感程度远超紫外(UV)吸光法,有效降低了样品使用量,实现了更为精细的DNA浓度测量。
3.出色耐受性:即便在含有高浓度盐类、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白质或琼脂糖等复杂条件下,Pico Green仍能稳定工作,无需事先纯化DNA,直接适用于PCR扩增产物的定量分析。
4.宽广的线性范围:在100 pg/mL至100 ng/mL的浓度区间内,Pico Green的荧光强度与DNA浓度呈现良好的线性关系,满足了多种应用场景的需求。
5.操作简便快捷:只需将染料加入样品中,简短染色5至6分钟后即可读数,非常适合于高通量分析,如96孔和384孔板的使用,且与多数荧光酶标仪兼容,大大简化了实验流程。
Pico Green的应用范围广泛,涵盖了DNA样品分析、PCR产物验证、基因芯片制备、DNA损伤研究、酶活性评估、基因组DNA定量、复杂混合物中dsDNA的筛选以及病毒DNA的精确定量等多个生命科学领域,例如cDNA文库的构建,亚克隆的DNA片段的纯化,定量DNA扩增产物,在药物中DNA分子残留的测定等,是科研人员和实验室技术人员不可或缺的高效工具。
实验原理
DNA样品 + Pico green荧光染料---等比混匀避光孵育5min,随后使用荧光仪进行检测
试剂准备
PicoGreen是以1mL的浓缩液形式保存在无水的 DMSO(二甲基亚砜)中。实验当天,配制 2 × PicoGreen试剂的工作溶液,用 1×TE按 1:200的比例稀释浓缩液(10mM Tris-HCl, 1mM EDTA,pH7.5)。如果要准备足够的工作溶液测定 20个样品,可在 20mL1x TE中加入 100μL PicoGreen dsDNA定量试剂。由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。 PicoGreen试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用箔包住或放置暗处避光保存。
溶液在配制好数小时内使用,以保证结果。
1标准品工作液的配制:Sigama小牛胸腺嘧啶DNA干粉1mg(Tris,Nacl等浓度已成标准体系),加入1mL双蒸水,配制成1mg∕mL的标准品工作液;
2标准品工作液稀释:
(1)母液稀释:取10ul(1mg∕mL)标准品工作液加入到990ul TE溶液中,浓度稀释成10ug∕mL,取10ul(10ug∕mL)标准品工作液加入到990ul TE溶液中,浓度稀释成100ng∕mL;
(2)倍比稀释:取800ul (100ng∕mL)的标准品工作液加入到200ul TE溶液中,浓度达到80ng∕mL(药典规定:荧光染色方法DNA含量在1.25-80 ng/mL范围线性较好, 该法DNA检出限为0.3 ng/ml),取500ul (80ng∕mL)的标准品工作液加入到500ul TE溶液中,浓度稀释到40ng∕mL;依次倍比稀释,配成20ng/ml、10ng/ml、5.0ng/ml、2.5ng/ml、1.25ng/ml、0.625ng/ml的标准品溶液;